Toată lumea știe că există multe laboratoare, deci câți oameni știu despre laboratoarele PCR? Și care sunt cerințele de bază pentru proiectarea laboratoarelor PCR? Apoi va exista VOLAB Xiaobian pentru a discuta cu toată lumea~
1, aspectul laboratorului PCR
Laboratorul de teste de amplificare PCR este, în principiu, împărțit în patru zone de lucru separate: zona de depozitare și pregătire a reactivilor, zona de pregătire a probei, zona de preparare și amplificare a amestecului de reacție de amplificare și zona de analiză a produsului de amplificare. Pentru a evita contaminarea-încrucișată, intrarea în fiecare zonă de lucru trebuie să urmeze cu strictețe o singură direcție, adică numai din zona de depozitare și pregătire a reactivilor → zona de pregătire a probei → zona de preparare a amestecului de reacție de amplificare și zona de amplificare → zona de analiză a produsului de amplificare. Transferul de reactiv și de probă între fiecare zonă experimentală trebuie efectuat printr-o fereastră de transfer.
2. Proiectarea Sistemului de Ventilatie Aer Conditionat de Laborator si Controlul Presiunii
Laboratoarele PCR nu au cerințe stricte de purificare, dar pentru a evita posibilitatea contaminării încrucișate între diferitele zone experimentale, se recomandă utilizarea unui sistem de distribuție a aerului cu flux complet-. În același timp, proporția de trimitere și epuizare ar trebui să fie strict controlată pentru a asigura cerințele de presiune ale fiecărei zone experimentale.
2.1, zona de pregătire a specimenelor
Principalele operațiuni din acest domeniu sunt conservarea probelor, extragerea acizilor nucleici (ARN, ADN), depozitarea și adăugarea acestora în tuburile de reacție de amplificare și determinarea sintezei ADN-ului. Cerințele de gradient de presiune în această zonă sunt: presiune pozitivă față de zona adiacentă pentru a evita contaminarea cu aerosoli din zona adiacentă în această zonă. În plus, din cauza posibilității de contaminare indusă de aerosoli-în timpul operațiunii de încărcare, trebuie evitată mersul inutil în zonă.
2.2. Zona de depozitare și preparare a reactivilor
Principalele operațiuni din această zonă experimentală sunt prepararea reactivilor de depozitare, distribuirea de reactivi și prepararea amestecurilor principale de reacție. Reactivii și materialele utilizate pentru prepararea probelor trebuie expediate direct în această zonă și nu trebuie să treacă prin alte zone. Materiile prime reactive trebuie depozitate în această zonă și pregătite în zonă în reactivii de depozitare necesari. Nu există cerințe stricte pentru controlul presiunii aerului.
2.3, zona de analiză a produsului de amplificare
Operația principală în acest domeniu este determinarea fragmentelor amplificate. Această zonă este principala sursă de contaminare a produsului amplificat. Prin urmare, cerințele gradientului de presiune pentru această zonă sunt: Presiune negativă în raport cu zona adiacentă pentru a evita difuzia produselor amplificate din zonă în alte zone.
2.4, prepararea amestecului de reacție de amplificare și zona de amplificare
Operația principală în acest domeniu este amplificarea ADN-ului. În plus, în această zonă se poate realiza și adăugarea șablonului ADN preparat (din zona de preparare a probei) și a amestecului de reacție principal (din zona de depozitare și preparare a reactivilor) pentru a prepara un amestec de reacție etc. Cerințele de gradient de presiune în această zonă sunt: presiune negativă față de zona adiacentă pentru a evita scurgerea de aerosoli din zonă. Pentru a evita poluarea cauzată de aerosoli, mersul inutil în zonă ar trebui redus la minimum. Operațiunile individuale, cum ar fi eșantionarea, trebuie efectuate în bancul curat.
3.1. Împărțirea strictă a zonei de lucru
(1) Amenajarea fiecărei zone experimentale este rezonabilă;
(2) Fiecare zonă experimentală trebuie să aibă semne evidente (cum ar fi numere uimitoare sau culori diferite de fond etc.) pentru a evita confuzia între echipamentele și reactivii din diferite zone experimentale.
3.2, setări rezonabile de sistem
(1) Setare rezonabilă a sistemului de ventilație-aer condiționat, încercați să utilizați sistemul complet de-trimitere de aer-;
(2) Controlul strict al presiunii fluxului de aer asigură cerințe diferite de presiune în diferite zone experimentale.
3.3, operațiunea standard
(1) Tehnicienii laboratorului de inspecție în amplificare trebuie să efectueze--formarea la locul de muncă și se pot angaja în teste clinice de amplificare a genelor numai după ce au promovat formarea;
(2) În timpul operațiunii experimentale, operatorul trebuie să poarte mănuși și să le înlocuiască frecvent. În plus, utilizarea capacelor de unică folosință în timpul funcționării este, de asemenea, o măsură eficientă de prevenire a contaminării;
(3) Lucrările de curățenie sunt oportune și corecte. După terminarea experimentului, zona trebuie curățată imediat. Pe lângă lichidele dezinfectante convenționale pentru dezinfectarea suprafețelor sau iradierea și dezinfectarea lămpilor cu ultraviolete, unele echipamente experimentale ar trebui să fie, de asemenea, supuse sterilizării la presiune înaltă.
3.4, management strict
(1) Controlați strict personalul care intră și iese din laborator. Persoanele care nu au legătură cu experimentul nu trebuie să intre sau să părăsească laboratorul după bunul plac și, dacă este necesar, trebuie să amenajeze pasaje și uși independente către și dinspre întreaga zonă experimentală.
(2) Reduceți la minimum mersul pe jos inutil în zona experimentală pentru a reduce posibilitatea contaminării-încrucișate.
(3) Zona de analiză a produsului amplificat este cea mai importantă sursă de contaminare a produsului amplificat. Soluția reziduală nu poate fi aruncată în laborator. Trebuie să fie înmuiat în soluția dezinfectantă și apoi aruncat într-un loc departe de laborator. Vârfurile folosite sunt de unică folosință. Materialele trebuie, de asemenea, să fie dezinfectate și sterilizate și apoi tratate uniform, cum ar fi incinerarea;
(4) Zona de analiză a produsului de amplificare poate folosi anumite mutații genetice și substanțe toxice și ar trebui să se acorde o atenție deosebită protecției de siguranță a experimentatorului.
3.5. Dotări complete de laborator
Dotări complete de sprijin pentru laborator sunt condiții necesare pentru asigurarea muncii experimentale. Echipamentele și instrumentele corespunzătoare trebuie echipate în funcție de diferitele conținuturi experimentale ale fiecărui laborator, cum ar fi bancuri ultra-curate, centrifuge și alimentatoare de probe.